多杀性巴氏杆菌中recN基因的克隆、原核表达及生物信息学分析

试验旨在对多杀性巴氏杆菌recN基因进行克隆和原核表达，并对其表达蛋白进行生物信息学分析。参照GenBank中recN基因序列（登录号：CP003313.1）设计1对引物，通过PCR扩增获得目的基因片段，构建pET-28a（+）-recN重组质粒并转化E.coliDH5α感受态细胞，提取质粒进行酶切鉴定，将鉴定正确的重组质粒转化E.coliBL21（DE3）感受态细胞，经IPTG诱导表达，对融合蛋白进行SDS-PAGE及Western blotting鉴定。结果表明，试验成功克隆了大小约为1 677 bp的recN基因序列，通过诱导表达的His-Tag融合蛋白大小约为66.94 ku，主要以包涵体形式存在。经生物信息学分析，recN蛋白的分子式为C₂₇₃₅H₄₄₂₈N₇₈₆O₈₅₅S₁₆，消光系数为24 785，不稳定系数为43.99，属于不稳定蛋白；理论等电点（pI）为5.62，为酸性蛋白；总平均亲水性为-0.316，与试验表达的包涵体蛋白性质相同，即同为疏水性蛋白；recN蛋白在哺乳动物网织红细胞的半衰期为30 h，在酵母（体内）中的半衰期>20 h，在大肠杆菌（体内）中的半衰期>10 h；二级结构主要以α-螺旋（64.87%）及无规则卷曲（21.00%）为主；经疏水性分析，预测该蛋白有3个高疏水性区域和9个高亲水性区域。本试验结果为进一步探究多杀性巴氏杆菌recN基因的功能提供了参考依据。     

杨木预水解过程中化学组分的降解行为及P因子调控作用

预水解具有环境友好性,符合生物炼制的理念。前期关于预水解的研究多集中于半纤维素的降解、分离和利用,而有关预水解过程中木质素降解的系统研究鲜有报道。以杨木为原料,在130~210℃条件下保温30~120 min进行预水解,结合P因子研究得率、葡聚糖、木聚糖、酸不溶木质素和酸溶木质素的降解率,揭示P因子对木质素降解行为的调控作用,探讨各化学组分在预水解过程中的相互作用。研究表明,预水解过程中木质素发生了一定程度的碎片化。随温度升高和时间延长,酸不溶木质素降解率均逐渐升高;当温度为190和210℃时,随时间延长,酸溶木质素降解率先升高后降低。试验证明,P因子对杨木木质素的降解具有调控作用。随着P因子增加,酸不溶木质素降解率呈指数上升,且分为快速降解(P因子<1500)和缓慢降解(P因子>1500)两个阶段;酸溶木质素降解率先上升后下降,在P因子为1926时达到最大值45.9%。此外,预水解过程中碳水化合物和木质素的降解具有相互作用关系。碳水化合物的降解为木质素的溶出打开了物理通道,同时木质素的重新吸附阻碍了其进一步降解。     

不同花生品种对花生果腐病的抗性鉴定

采用自然病圃鉴定法，对76个花生品种（系）进行了花生果腐病抗性评价，以期为抗病育种及田间病害防 治提供理论依据和抗性材料。结果表明，不同花生品种间对花生果腐病的抗性存在着显著差异，供试76份花生品 种（系）中未发现对果腐病免疫的品种，获得高抗品种2个，抗病品种7个，中抗品种12个，感病品种21个，高感品种 33个。聚类分析结果表明，分支I中的9个品种（尤其是花育9115）抗性较好，可进一步加以利用。花生对果腐病的 抗感性与荚果鲜重之间不存在显著相关。     

小麦热激蛋白转录因子C家族基因的结构及其在干旱胁迫中的表达

小麦热激蛋白转录因子在热胁迫和耐热性产生的过程中发挥重要作用。为进一步了解小麦热激蛋白转录因子C亚家族,本研究采用全基因组信息保守结构域比对和进化聚类分析,共鉴定了24个小麦TaHsfC基因,并对TaHsfC亚家族成员染色体定位、基因结构、亚细胞定位、对应蛋白质的氨基酸特点、基因表达进行了分析。结果表明,24个TaHsfCs主要分布在5条染色体上,其中A基因组中有7个,B基因组中9个,D基因组中有6个,另外两个所在染色体位置不清楚。TaHsfCs含有0～2个内含子,其中 TaHsfC1亚族基因含有1～2个内含子, TaHsfC2亚族基因则含有0～1个内含子。聚类分析表明,小麦TaHsfC成员共分为 TaHsfC1和 TaHsfC2两个亚族。24个TaHsfCs成员全部定位于细胞核。在15%PEG模拟干旱条件下,干旱敏感品种矮抗58和耐旱品种晋麦47中有10个TaHsfC基因显著上调表达,其中 TaHsfC2亚族基因的表达量上调倍数均高于 TaHsfC1亚族基因(其中 TaHsfC2j和 TaHsfC2k未在晋麦47中检测到表达量)。本研究可为探索小麦热激蛋白转录因子C家族基因在小麦抗旱中的分子机制提供一定的理论支撑。     

花后早期增温对小麦旗叶光合和抗氧化特性及籽粒发育的影响

为探究小麦花后早期增温对其旗叶和籽粒生长发育的影响，以黄淮海南片主栽小麦品种安农0711和烟农19为试验材料，通过在小麦花后0～10 d搭棚覆盖PO薄膜方式进行人工模拟增温（增温1~ 3 ℃），测定分析了花后早期增温后小麦旗叶光合参数、叶绿素含量、抗氧化酶活性、MDA含量和籽粒性状的变化。结果表明，与常温对照相比，增温显著降低了旗叶净光合速率、叶绿素含量及 CAT和POD活性，增加了旗叶胞间CO₂浓度和MDA含量，加速了旗叶衰老，使籽粒长度、宽度、厚度和千粒重均下降，安农0711和烟农19的粒重降幅分别为5.43%和7.34%。这说明在本试验条件下，花后早期增温不利于小麦旗叶光合和抗氧化作用，加速旗叶衰老，抑制籽粒发育。     

在宽泛的稠度范围内估算面粉标准粉质参数的可行性探索

为在宽泛的稠度范围内检测和估算小麦的粉质参数以服务品质育种，本研究通过构建和应用复合粉质参数，并结合梯度加水、目测加水和误差控制技术，明显降低了加水量对测定结果的影响，成功建立了一系列逻辑算式和回归方程，定量描述了宽泛稠度与标准稠度（500 FU）下检测结果之间的转换关系，实现了标准检测结果的非直接测定。目测加水估计结果与对应标准值的相关性显示，形成时间、稳定时间、粉质质量指数和弱化度的估计标准值与标准值间的相关系数r=0.988～0.995；从不同途径推导出标准加水量预测的三个算式，其预测结果与标准值的相关系数r=0.983～0.995，综合预测效果明显优于单纯粉质仪内置软件的预测值。从而，用小而确定的样品量与一次目测加水测定（推荐稠度440～650 FU）估计标准检测结果，且可据此准确地调整加水量，直接测得达标的粉质参数。另外，借用逻辑算式还可将全部参数的达标值矫正为稠度500 FU时的标准值，使传统的粉质检测结果更加精准、更具可比性。     

西藏地区青稞籽粒营养品质分析及评价

为探明西藏地区青稞品种间的性状差异及性状间的相关性，筛选优异品质青稞种质，以251个西藏青稞种质资源为材料，测定了籽粒淀粉、粗蛋白、β-葡聚糖、γ-氨基丁酸、大量元素（Ca、P）、微量元素（Fe、Zn、Se）含量共9个品质指标，分析了被测指标间关系。结果表明，所测定的9项品质指标在供试种质资源间均存在不同程度的差异，淀粉含量的变异系数最小，Se含量的变异系数最大；粗蛋白与淀粉含量呈极显著负相关（r= -0.54），粗蛋白与γ-氨基丁酸、Ca、P、Zn、Fe含量均呈极显著正相关。对被测指标进行主成分分析发现，可将9项品质指标简化成3个主成分，其累积方差贡献率为74.5%，其中第一主成分因子的贡献率达到了 48.0%，第一主成分中因子载荷量大的品质指标是Zn、P、Ca、粗蛋白、γ-氨基丁酸、淀粉、Fe含量。综合评价筛选出10个营养品质较高的种质，分别为BJX152、BJX008、BJX149、BJX004、BJX003、BJX015、BJX005、藏青2000、BJX227、喜马拉22号。     

第三次全国农作物种质资源调查与收集行动湖南茶树专项总结报告

2015年10月至2018年12月,项目组参与第三次全国农作物种质资源调查与收集行动,对湖南省茶树种质资源进行普查、调查和征集、收集,共普查、调查和征集、收集茶树种质资源165份,涉及45个农业县(市、区),范围为东经109.176821°~114.005865°、北纬24.943720°~29.819774°、海拔31.33~1469.00m,并对湖南茶树种质资源的保护和合理开发利用提出了建议。     

蒙古族“茶境”探析

古人常用“骏马秋风蓟北,杏花春雨江南”概括南北两地风土人情,仿佛煮茗烹茶之事与漠北草原的蒙古族并无瓜葛。殊不知茶已随南北贸易的繁荣与发达而悄然北上,并逐渐形成了独特的饮茶境遇。本文从器、烹、礼、寓、忌等五个方面对蒙古族“茶境”进行系统探索与阐述,旨在为蒙古族饮茶文化的研究提供参考。